MAP-1B Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-400981

Panoramica

MAP1B codifica la proteina associata ai microtubuli 1B (MAP-1B), un regolatore neuronale del citoscheletro che si lega ai microtubuli e a complessi associati all’actina per sostenere la crescita dei neuriti, la guida assonale e la dinamica del cono di crescita. MAP-1B contribuisce alla stabilizzazione dei microtubuli, al rimodellamento del citoscheletro e ai processi di trasporto intracellulare che modellano la polarizzazione neuronale e la formazione dei circuiti. Le sue funzioni dipendenti dalla fosforilazione si intrecciano con vie di segnalazione che governano la plasticità del citoscheletro e lo sviluppo sinaptico. La disregolazione dell’espressione o della funzione di MAP1B è stata collegata a meccanismi di malattie del neurosviluppo e neurodegenerative, rendendolo un utile bersaglio per studiare le relazioni struttura–funzione nei neuroni.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO MAP-1B (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene MAP1B in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del MAP1B insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto MAP1B a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina MAP-1B.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di MAP1B per lo studio della segnalazione di MAP-1B, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni MAP1B critici per la funzione di MAP-1B
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di MAP1B per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal MAP-1B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal MAP-1B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus MAP1B. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal MAP-1B Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR MAP-1B (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia MAP1B per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio MAP1B definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.