LRP4 Plasmide Double Nickase (h): sc-401708-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LRP4 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LRP4 Double Nickase Plasmid (h) e il LRP4 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira LRP4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LRP4 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401708-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LRP4 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401708-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LRP4 (low-density lipoprotein receptor–related protein 4) è un recettore transmembrana a singolo passaggio della famiglia dei recettori delle LDL, che funge da impalcatura chiave per le interazioni con ligandi extracellulari e per la trasduzione del segnale sulla superficie cellulare. Nella giunzione neuromuscolare, LRP4 lega l’agrina e coopera con MuSK per avviare il clustering dei recettori e la specializzazione postsinaptica, collegando segnali extracellulari all’organizzazione del citoscheletro e alla sinaptogenesi. In biologia ossea, LRP4 modula la segnalazione Wnt/β-catenina interagendo con antagonisti Wnt secreti come sclerostina e DKK1, influenzando l’attività degli osteoblasti e la regolazione della massa ossea. Alterazioni genetiche di LRP4 sono state associate a fenotipi neuromuscolari e scheletrici congeniti, rendendolo un bersaglio rilevante per lo studio dello sviluppo sinaptico e dei meccanismi di rimodellamento osseo.
LRP4 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus LRP4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di LRP4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di LRP4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con LRP4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.