LRP16 Plasmide Double Nickase (m): sc-430699-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LRP16 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LRP16 Double Nickase Plasmid (m) e il LRP16 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Macrod1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LRP16 Plasmide Double Nickase (m) | sc-430699-NIC | 20 µg | $410.00 |
Macrod1 codifica LRP16, una proteina nucleare contenente un macrodomain che lega il mono-ADP-ribosio e interagisce con la segnalazione di ADP-ribosilazione dipendente da PARP. Nelle cellule di topo, LRP16 è stata associata alla regolazione di processi legati alla cromatina, inclusi il controllo trascrizionale, le risposte al danno del DNA e il mantenimento del genoma accoppiato al ciclo cellulare. Attraverso queste funzioni, MACROD1/LRP16 viene studiata in vie che collegano la segnalazione dei recettori nucleari, le risposte allo stress e le dinamiche delle modifiche post-traduzionali. Un’espressione alterata o un’attività deregolata di LRP16 è spesso oggetto di studio in contesti di controllo della proliferazione e instabilità genomica rilevanti per la biologia del cancro e per modelli di segnalazione infiammatoria.
LRP16 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Macrod1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Macrod1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Macrod1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Macrod1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.