Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LHX1 Plasmide Double Nickase (h): sc-403100-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LHX1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LHX1 Double Nickase Plasmid (h) e il LHX1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira LHX1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LHX1 Antibody (C-6): sc-515631
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LHX1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403100-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LHX1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403100-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LHX1 (LIM homeobox 1) codifica un fattore di trascrizione homeodominio contenente un dominio LIM, che coordina la definizione dei pattern tissutali e le decisioni sul destino cellulare durante lo sviluppo embrionale. Nelle cellule umane, LHX1 regola programmi trascrizionali specifici di linea legandosi al DNA e interagendo con cofattori che modulano la cromatina e le reti trascrizionali. È implicato in processi di sviluppo tra cui la patternizzazione assiale e la specificazione del sistema urogenitale, collegando la sua attività a vie che governano differenziamento e morfogenesi. Un’espressione deregolata di LHX1 è stata associata ad anomalie congenite ed è stata riportata in sottogruppi di tumori, rendendolo rilevante per lo studio dei meccanismi di controllo trascrizionale in contesti patologici.
LHX1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus LHX1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di LHX1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di LHX1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con LHX1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.