Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LDLR Plasmide Double Nickase (h): sc-400645-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LDLR Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LDLR Double Nickase Plasmid (h) e il LDLR Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira LDLR. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LDLR Antibody (C7): sc-18823
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LDLR Plasmide Double Nickase (h) | sc-400645-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LDLR Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400645-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il recettore delle lipoproteine a bassa densità (LDLR) è un recettore endocitico di superficie cellulare che lega le lipoproteine contenenti apolipoproteina B ed E e media l’internalizzazione delle particelle LDL dipendente dalla clatrina, regolando così l’assorbimento cellulare di colesterolo e l’omeostasi lipidica sistemica. Dopo l’endocitosi, l’LDLR in genere si dissocia dal ligando nell’endosoma acido e ricicla verso la membrana plasmatica, collegando il traffico del recettore al rilevamento del colesterolo e alla biogenesi delle membrane. L’attività dell’LDLR si integra con i programmi trascrizionali controllati da SREBP, con l’esterificazione intracellulare del colesterolo e con la regolazione a feedback del metabolismo lipidico. Alterazioni dell’espressione o della funzione di LDLR sono ampiamente studiate nella biologia delle dislipidemie e nei percorsi correlati all’aterosclerosi, nonché in modelli cellulari di captazione delle lipoproteine e di riciclo recettoriale.
LDLR Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus LDLR nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di LDLR. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di LDLR. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con LDLR interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.