L-serine dehydratase Plasmide Double Nickase (h): sc-408194-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- L-serine dehydratase Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il L-serine dehydratase Double Nickase Plasmid (h) e il L-serine dehydratase Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SDS. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
L-serine dehydratase Plasmide Double Nickase (h) | sc-408194-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
L-serine dehydratase Plasmide Double Nickase (h2) | sc-408194-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La SDS umana codifica la L-serina deidratasi, un enzima dipendente dal fosfato di piridossale che catalizza la deaminazione della L-serina in piruvato e ammoniaca, collegando il catabolismo della serina al metabolismo centrale del carbonio e al bilancio dell’azoto cellulare. Modulando la disponibilità di unità monocarboniose derivate dalla serina e l’apporto di piruvato, l’attività di SDS si intreccia con il metabolismo degli amminoacidi, l’omeostasi redox e le vie bioenergetiche. La regolazione alterata dell’utilizzo della serina è frequentemente studiata in contesti in cui il rimodellamento metabolico influenza la proliferazione, l’adattamento allo stress e i programmi di differenziamento. Di conseguenza, SDS rappresenta un nodo utile per esplorare come il flusso di amminoacidi influenzi le reti biosintetiche e di segnalazione a valle nelle cellule umane.
L-serine dehydratase Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SDS nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SDS. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SDS. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SDS interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.