KCTD1 Plasmide Double Nickase (h): sc-406758-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- KCTD1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il KCTD1 Double Nickase Plasmid (h) e il KCTD1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira KCTD1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
KCTD1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406758-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
KCTD1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406758-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KCTD1 umano (potassium channel tetramerization domain-containing protein 1) è una proteina adattatrice contenente un dominio BTB/POZ, implicata in interazioni proteina–proteina che influenzano la proteostasi mediata dall’ubiquitina e il controllo trascrizionale. KCTD1 è stato associato alla modulazione di reti di segnalazione che governano la differenziazione cellulare e la definizione dei pattern di sviluppo, in linea con i ruoli dei complessi associati alla famiglia BTB-Kelch nella regolazione della stabilità dei substrati e dei programmi di espressione genica. La variabilità genetica in KCTD1 è associata a disturbi dello sviluppo, inclusa la sindrome cuoio capelluto–orecchio–capezzolo, a supporto della sua rilevanza per la morfogenesi e la biologia delle linee ectodermiche. Queste caratteristiche rendono KCTD1 un bersaglio utile per studiare i percorsi che collegano il turnover proteico regolato, la regolazione trascrizionale e lo sviluppo dei tessuti.
KCTD1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus KCTD1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di KCTD1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di KCTD1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con KCTD1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.