Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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JunD Plasmide Double Nickase (h): sc-400713-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- JunD Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il JunD Double Nickase Plasmid (h) e il JunD Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira JUND. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: JunD Antibody (D-9): sc-271938
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
JunD Plasmide Double Nickase (h) | sc-400713-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
JunD Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400713-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
JUND codifica JunD, un fattore di trascrizione della famiglia AP-1 che dimerizza con le proteine JUN e FOS per regolare programmi di espressione genica dipendenti dagli stimoli. JunD integra segnali dalle vie MAPK/ERK e JNK per controllare proliferazione, differenziamento, risposte allo stress ossidativo e apoptosi, attraverso la modulazione trascrizionale di geni del ciclo cellulare e dell’infiammazione. Un’alterata attività di AP-1 che coinvolge JunD è stata implicata nella trasformazione oncogena, nella fibrosi e in stati infiammatori cronici, rendendo JUND un nodo rilevante per analizzare reti trascrizionali specifiche del contesto. Nelle cellule umane, JunD contribuisce anche a complessi regolatori associati alla cromatina che modulano l’attività degli enhancer e la trascrizione adattativa allo stress.
JunD Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus JUND nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di JUND. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di JUND. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con JUND interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.