Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
involucrin Plasmide Double Nickase (h): sc-416724-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- involucrin Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il involucrin Double Nickase Plasmid (h) e il involucrin Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira IVL. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: involucrin Antibody (SY5): sc-21748
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
involucrin Plasmide Double Nickase (h) | sc-416724-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
involucrin Plasmide Double Nickase (h2) | sc-416724-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IVL codifica l’involucrina, un marcatore della differenziazione dei cheratinociti che viene reticolato nell’involucro corneo dalle transglutaminasi per rafforzare la barriera epidermica. L’involucrina partecipa ai programmi di differenziazione terminale, coordinati con il rimodellamento dei filamenti intermedi di cheratina e con la segnalazione calcio-dipendente che sostiene la cornificazione. Alterazioni dell’espressione di IVL e dell’assemblaggio dell’involucro sono state associate a una disregolazione dell’omeostasi epidermica in condizioni cutanee infiammatorie e iperproliferative, tra cui psoriasi e dermatite atopica, e vengono spesso esaminate nel contesto dei difetti di barriera. Di conseguenza, IVL è ampiamente utilizzato per studiare la maturazione dell’epitelio stratificato, la formazione della barriera e le reti trascrizionali che governano il destino dei cheratinociti.
involucrin Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IVL nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IVL. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IVL. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IVL interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.