HoxD10 Plasmide Double Nickase (h): sc-403328-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HoxD10 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HoxD10 Double Nickase Plasmid (h) e il HoxD10 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HOXD10. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HoxD10 Antibody (G-3): sc-166235
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HoxD10 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403328-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HoxD10 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403328-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXD10 codifica il fattore di trascrizione homeobox HoxD10, un regolatore del legame al DNA specifico di sequenza che contribuisce a stabilire l’identità posizionale e i programmi di differenziamento durante lo sviluppo embrionale. Nelle cellule umane, HoxD10 influenza reti trascrizionali coinvolte nella morfogenesi, nell’adesione cellulare e nell’organizzazione del citoscheletro, integrandosi con le più ampie vie di patterning dei geni HOX e con gli effettori a valle che modellano l’architettura dei tessuti. Una deregolazione dell’espressione di HOXD10 o alterazioni dei suoi circuiti di regolazione sono state riportate in diversi contesti tumorali, in cui viene spesso studiato per i legami con la transizione epitelio–mesenchimale, l’espressione di geni associati all’invasione e il comportamento metastatico. In quanto regolatore dello sviluppo con effetti dipendenti dal contesto, HOXD10 viene anche utilizzato per indagare come i programmi trascrizionali vengano riprogrammati lungo i processi di differenziamento e negli stati rilevanti per la malattia.
HoxD10 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HOXD10 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HOXD10. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HOXD10. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HOXD10 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.