Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HIP1 Plasmide Double Nickase (h): sc-402515-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HIP1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HIP1 Double Nickase Plasmid (h) e il HIP1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HIP1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HIP1 Antibody (4B10): sc-47754
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HIP1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402515-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HIP1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402515-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HIP1 umano (huntingtin interacting protein 1) codifica un adattatore endocitico che collega le invaginazioni rivestite di clatrina al citoscheletro di actina e coordina il traffico dei recettori tirosin-chinasici e di altre proteine di membrana. Tramite il suo dominio ANTH e le interazioni con clatrina/AP-2, HIP1 contribuisce a regolare internalizzazione, riciclo e output di segnalazione dei recettori per i fattori di crescita, influenzando vie che controllano proliferazione, sopravvivenza e dinamica del citoscheletro. Alterazioni dell’espressione di HIP1 o riarrangiamenti sono stati riportati in diversi tumori e vengono studiati per il loro impatto sul turnover recettoriale e sulla segnalazione oncogenica. HIP1 è inoltre oggetto di studio nel contesto della proteostasi e della neurobiologia, grazie alla sua connessione funzionale con processi associati alla huntingtina.
HIP1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HIP1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HIP1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HIP1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HIP1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.