Date published: 2026-7-12

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HEXIM1 Plasmide Double Nickase (h): sc-402333-NIC

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Schede Tecniche
  • Specie Target: human
  • 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
  • HEXIM1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
  • Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
  • Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
  • Il HEXIM1 Double Nickase Plasmid (h) e il HEXIM1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HEXIM1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
  • In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HEXIM1 Antibody (D-8): sc-390059
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    HEXIM1 Plasmide Double Nickase (h)

    sc-402333-NIC
    20 µg
    $410.00

    HEXIM1 Plasmide Double Nickase (h2)

    sc-402333-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    HEXIM1 (hexamethylene bis-acetamide inducible 1) codifica un regolatore nucleare dell’allungamento trascrizionale che modula l’attività di P-TEFb attraverso il complesso snRNP 7SK, influenzando il rilascio dalla pausa dell’RNA polimerasi II e i programmi di espressione genica. Legandosi e inibendo CDK9/Ciclina T, HEXIM1 contribuisce al controllo della progressione del ciclo cellulare, della differenziazione e delle reti trascrizionali responsivi allo stress. Alterazioni dell’espressione o della regolazione di HEXIM1 sono state associate a un controllo trascrizionale deregolato nella biologia dei tumori e sono state studiate anche in contesti di segnalazione ormonale e rimodellamento cardiaco. In quanto fattore nodale nel controllo dell’allungamento, HEXIM1 è spesso oggetto di studio per analizzare effetti a livello di via sulla trascrizione, sui processi associati alla cromatina e sui fenotipi a valle.

    HEXIM1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HEXIM1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HEXIM1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HEXIM1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

    Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HEXIM1 interrotto.

    Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.