HCF1 Plasmide Double Nickase (h): sc-403097-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HCF1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HCF1 Double Nickase Plasmid (h) e il HCF1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HCFC1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HCF1 Antibody (H-8): sc-390950
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HCF1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403097-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HCF1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403097-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HCFC1 codifica il fattore della cellula ospite 1 (HCF1), un coregolatore trascrizionale associato alla cromatina che coordina la progressione del ciclo cellulare e i programmi di trascrizione fungendo da ponte tra fattori di trascrizione sequenza-specifici e complessi epigenetici e coattivatori. HCF1 contribuisce alla regolazione dei geni dipendenti da E2F, alle dinamiche delle modificazioni istoniche e alla progressione mitotica, sostenendo il controllo della proliferazione e l’omeostasi cellulare. Attraverso queste interazioni, HCF1 influenza vie coinvolte nella replicazione del DNA, nelle risposte allo stress e nell’espressione genica specifica di linea cellulare. Varianti e deregolazione di HCFC1 sono state associate a fenotipi neuroevolutivi e a un controllo trascrizionale alterato, rendendolo un bersaglio rilevante per studi meccanicistici nelle cellule umane.
HCF1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HCFC1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HCFC1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HCFC1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HCFC1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.