GSTT1 Plasmide Double Nickase (h): sc-408735-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GSTT1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GSTT1 Double Nickase Plasmid (h) e il GSTT1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GSTT1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GSTT1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-408735-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GSTT1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-408735-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La glutatione S-transferasi theta 1 (GSTT1) è un enzima di detossificazione di fase II che catalizza la coniugazione del glutatione con xenobiotici elettrofili e metaboliti endogeni reattivi, contribuendo all’omeostasi redox e alla protezione dallo stress ossidativo. Partecipa a vie di difesa cellulare che limitano l’accumulo di intermedi in grado di danneggiare DNA e proteine, influenzando la sensibilità ai tossici ambientali e alle specie reattive derivate dai farmaci. Varianti genetiche comuni e genotipi null di GSTT1 sono associati a differenze interindividuali nel metabolismo e sono stati studiati nel contesto della suscettibilità al cancro, dei disturbi infiammatori e delle risposte avverse a esposizioni chimiche. In quanto enzima citosolico con ampia specificità di substrato, GSTT1 è spesso utilizzato per studiare la biotrasformazione dipendente dal glutatione e la segnalazione della risposta allo stress in modelli cellulari umani.
GSTT1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GSTT1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GSTT1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GSTT1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GSTT1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.