GPR52 Plasmide Double Nickase (h): sc-411266-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GPR52 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GPR52 Double Nickase Plasmid (h) e il GPR52 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GPR52. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GPR52 Plasmide Double Nickase (h) | sc-411266-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPR52 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-411266-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPR52 codifica un recettore orfano di classe A accoppiato a proteine G (GPCR) che segnala prevalentemente attraverso Gs, aumentando il cAMP intracellulare e attivando programmi trascrizionali dipendenti da PKA/CREB. È arricchito in regioni cerebrali collegate ai circuiti dei gangli della base, dove modula l’eccitabilità neuronale e la segnalazione sinaptica a valle delle vie dei secondi messaggeri dei GPCR. Attraverso gli effetti sull’omeostasi del cAMP e sull’attività di rete, GPR52 è spesso studiato nel contesto della neurobiologia e del cross-talk tra vie di segnalazione, in particolare con la segnalazione dopaminergica. Dinamiche alterate della segnalazione GPCR che coinvolgono GPR52 sono state investigate in relazione a fenotipi neuropsichiatrici e associati alla neurodegenerazione in modelli sperimentali.
GPR52 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GPR52 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GPR52. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GPR52. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GPR52 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.