GPR41 Plasmide Double Nickase (h): sc-402190-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GPR41 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GPR41 Double Nickase Plasmid (h) e il GPR41 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FFAR3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GPR41 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402190-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPR41 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402190-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FFAR3 umano codifica il recettore accoppiato a proteina G GPR41, un sensore degli acidi grassi a catena corta attivato da metaboliti microbici come propionato e butirrato. In seguito al legame con il ligando, GPR41 si accoppia principalmente alla segnalazione Gi/o, riducendo i livelli di cAMP e modulando vie a valle, tra cui MAPK/ERK, con effetti sul bilancio energetico cellulare, sulla secrezione ormonale e sulla funzione delle cellule immunitarie. L’attività di FFAR3 è implicata nella comunicazione intestino–ospite e nella regolazione metabolica, con evidenze di ricerca che la collegano a obesità, sensibilità all’insulina e processi infiammatori. La sua espressione in tessuti enteroendocrini e periferici supporta inoltre lo studio della segnalazione neuroendocrina e di risposte specifiche di tessuto a segnali derivati dal microbioma.
GPR41 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FFAR3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FFAR3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FFAR3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FFAR3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.