Glut9 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406232

Panoramica

SLC2A9 codifica Glut9, un trasportatore facilitativo che svolge un ruolo centrale nella gestione cellulare dell’urato e nel trasporto degli esosi, con una funzione di rilievo nella fisiologia renale ed epatica. Glut9 contribuisce al movimento transmembrana dell’acido urico e di metaboliti correlati, influenzando l’omeostasi sistemica dell’urato e l’equilibrio redox. Un’alterata attività di SLC2A9 è associata a variazioni dei livelli sierici di urato ed è stata implicata in disturbi del metabolismo delle purine, inclusi l’iperuricemia e la suscettibilità alla gotta, oltre che in fenotipi correlati al rene. Nei modelli cellulari, la perturbazione di SLC2A9 può influenzare i flussi metabolici, le risposte allo stress ossidativo e le reti di trasportatori rilevanti per il trasporto epiteliale e le vie di sensing dei nutrienti.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Glut9 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SLC2A9 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SLC2A9 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SLC2A9 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Glut9.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SLC2A9 per lo studio della segnalazione di Glut9, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni SLC2A9 critici per la funzione di Glut9
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SLC2A9 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Glut9 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Glut9 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SLC2A9. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Glut9 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Glut9 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SLC2A9 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SLC2A9 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.