Glucose Transporter Glut8 Plasmide Double Nickase (m): sc-424976-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Glucose Transporter Glut8 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Glucose Transporter Glut8 Double Nickase Plasmid (m) e il Glucose Transporter Glut8 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Slc2a8. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Glucose Transporter Glut8 Plasmide Double Nickase (m) | sc-424976-NIC | 20 µg | $410.00 |
Slc2a8 codifica per il trasportatore di glucosio GLUT8 (SLC2A8), un trasportatore facilitativo di esosi che contribuisce all’assorbimento cellulare di carboidrati e alla gestione intracellulare del glucosio nei tessuti del topo. L’attività di GLUT8 influenza l’omeostasi energetica modulando il flusso glicolitico e la disponibilità di substrati per il metabolismo ossidativo, intersecandosi con l’utilizzo del glucosio insulino-responsivo e con vie di nutrient-sensing come AMPK e mTOR. Oltre al metabolismo sistemico, SLC2A8 è stato collegato anche alla fisiologia riproduttiva e neuronale, in cui un trasporto del glucosio alterato può influire sulla vitalità cellulare e sulla differenziazione. La disregolazione del trasporto del glucosio e la riprogrammazione metabolica sono ampiamente pertinenti ai meccanismi dell’obesità, della resistenza all’insulina e del diabete, supportando lo studio di Slc2a8 nello stress metabolico e nella gestione tessuto-specifica del glucosio.
Glucose Transporter Glut8 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Slc2a8 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Slc2a8. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Slc2a8. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Slc2a8 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.