Gigaxonin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407001-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GigaxoninO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Gigaxonin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Gigaxonin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GAN. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Gigaxonin Anticorpo (F-3): sc-376173
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Gigaxonin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407001-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Gigaxonin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407001-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **GAN** codifica a gigaxonina, uma proteína adaptadora da família BTB-Kelch para complexos de ligase E3 de ubiquitina baseados em CUL3, que promove a ubiquitinação e a degradação proteassomal de substratos específicos. A gigaxonina é um regulador-chave da homeostase de filamentos intermediários e de proteínas associadas a microtúbulos, sustentando a organização do citoesqueleto axonal e a integridade neuronal. Por meio do controle de vias de qualidade proteica e da dinâmica do citoesqueleto, a gigaxonina influencia processos como manutenção do axônio, transporte intracelular e respostas ao estresse. Variantes de perda de função em **GAN** estão associadas à neuropatia axonal gigante, um distúrbio neurodegenerativo caracterizado por acúmulo anormal de filamentos intermediários e patologia axonal.
Gigaxonin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GAN em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GAN. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GAN. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GAN interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.