FTSJ1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-411789

Panoramica

FTSJ1 codifica una RNA 2′-O-metiltransferasi conservata, dipendente dalla S-adenosil-L-metionina, che modifica specifici tRNA per supportare una decodifica accurata e una traduzione efficiente. Modellando i profili delle modifiche dei tRNA, FTSJ1 influenza la proteostasi, le risposte allo stress e il controllo globale della sintesi proteica, in intersezione con la funzione del ribosoma e con le vie di controllo qualità della traduzione. L’alterazione dell’attività di FTSJ1 è stata collegata a fenotipi neuroevolutivi e le varianti patogene sono associate a disabilità intellettiva legata al cromosoma X, evidenziandone l’importanza nei programmi di espressione genica neuronale. Stati alterati delle modifiche dei tRNA correlati a FTSJ1 possono inoltre influenzare la crescita e la differenziazione cellulare attraverso effetti a valle sulla fedeltà della traduzione.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO FTSJ1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene FTSJ1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del FTSJ1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto FTSJ1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina FTSJ1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di FTSJ1 per lo studio della segnalazione di FTSJ1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni FTSJ1 critici per la funzione di FTSJ1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di FTSJ1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal FTSJ1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal FTSJ1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus FTSJ1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal FTSJ1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR FTSJ1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia FTSJ1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio FTSJ1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.