FASTKD2 Plasmide Double Nickase (h): sc-417574-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FASTKD2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il FASTKD2 Double Nickase Plasmid (h) e il FASTKD2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira FASTKD2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FASTKD2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-417574-NIC | 20 µg | $410.00 |
FASTKD2 (FAST kinase domains 2) codifica una proteina mitocondriale legante l’RNA che si localizza nella matrice e supporta la regolazione post-trascrizionale dell’espressione genica mitocondriale. FASTKD2 contribuisce alla maturazione, alla stabilità e al turnover degli RNA mitocondriali, influenzando così la fosforilazione ossidativa e l’assemblaggio della catena respiratoria. Attraverso il suo ruolo nel metabolismo dell’RNA mitocondriale e nella proteostasi, FASTKD2 incide sull’omeostasi energetica cellulare, sulle risposte allo stress e sulla segnalazione dell’apoptosi. L’alterazione genetica o la disfunzione di FASTKD2 è stata associata a encefalomiopatia mitocondriale e a fenotipi del neurosviluppo, rendendolo un bersaglio rilevante per lo studio dei meccanismi delle malattie mitocondriali.
FASTKD2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus FASTKD2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di FASTKD2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di FASTKD2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con FASTKD2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.