Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
eIF2Bα Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404034-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- eIF2BαO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase eIF2Bα (h) e o Plasmídeo Double Nickase eIF2Bα (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EIF2B1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:eIF2Bα Anticorpo (C-11): sc-376846
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
eIF2Bα Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404034-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
eIF2Bα Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404034-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EIF2B1 codifica a subunidade eIF2Bα do fator eucariótico de iniciação da tradução 2B (eIF2B), um heteropentâmero que atua como fator de troca de nucleotídeos de guanina e regenera eIF2-GTP para sustentar a síntese proteica dependente de cap. O eIF2B integra sinais da resposta integrada ao estresse ao modular a sensibilidade ao eIF2α fosforilado, conectando assim a disponibilidade de nutrientes, a proteostase e a recuperação celular do estresse do retículo endoplasmático (RE) ao controle translacional. Por meio desse papel, o EIF2B1 influencia as taxas globais de tradução, a dinâmica dos grânulos de estresse e programas a jusante que afetam o crescimento e a sobrevivência celular. A perturbação genética das subunidades do eIF2B, incluindo EIF2B1, está associada a distúrbios do espectro das leucodistrofias e oferece um ponto de entrada mecanístico para estudar a regulação translacional adaptativa ao estresse em células humanas.
eIF2Bα O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EIF2B1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EIF2B1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EIF2B1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EIF2B1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.