Dynein IC2, cytosolic Plasmide Double Nickase (h): sc-402079-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Dynein IC2, cytosolic Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Dynein IC2, cytosolic Double Nickase Plasmid (h) e il Dynein IC2, cytosolic Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira DYNC1I2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Dynein IC2, cytosolic Plasmide Double Nickase (h) | sc-402079-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Dynein IC2, cytosolic Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402079-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DYNC1I2 codifica la catena intermedia 2 della dineina citoplasmatica 1 (Dynein IC2), una subunità centrale del complesso motore dei microtubuli diretto verso l’estremità meno, che collega la dineina alla dynactina e a diversi adattatori di carico. Questo sistema motore supporta il traffico intracellulare di endosomi, lisosomi e vescicole derivate dal Golgi, oltre al posizionamento del centrosoma, all’organizzazione del fuso mitotico e al trasporto retrogrado necessario per l’omeostasi neuronale. La funzione di Dynein IC2 si integra con le vie del trasporto basato sui microtubuli, della progressione del ciclo cellulare e della dinamica degli organelli, che modellano la polarità e la proteostasi. Alterazioni del macchinario dineina–dynactina sono state implicate in fenotipi neuroevolutivi e neurodegenerativi e in altri disturbi legati a difetti del trasporto assonale e della fedeltà mitotica, rendendo DYNC1I2 un nodo utile per studi meccanicistici.
Dynein IC2, cytosolic Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DYNC1I2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DYNC1I2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DYNC1I2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DYNC1I2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.