Dlx-3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405063

Panoramica

DLX3 codifica il fattore di trascrizione homeobox Dlx-3, un regolatore legante il DNA essenziale per i programmi di linea cellulare derivati dall’ectoderma e dalla cresta neurale, inclusi la differenziazione epidermica, la morfogenesi del follicolo pilifero, l’odontogenesi e lo sviluppo cranio-facciale. Dlx-3 modula reti trascrizionali che coordinano la specificazione del destino cellulare, il patterning dei tessuti e la differenziazione terminale, interagendo con assi di segnalazione dello sviluppo più ampi, come i circuiti regolatori dipendenti da BMP e Wnt. Nella biologia umana, un’alterazione della funzione di DLX3 è associata a difetti degli annessi ectodermici e delle strutture cranio-facciali, a riflesso del suo ruolo nelle interazioni epitelio-mesenchimali. In quanto regolatore trascrizionale, Dlx-3 rappresenta un nodo sperimentalmente accessibile per studiare l’impegno di linea, la formazione della barriera e i programmi trascrizionali associati alla differenziazione.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Dlx-3 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene DLX3 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del DLX3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto DLX3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Dlx-3.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di DLX3 per lo studio della segnalazione di Dlx-3, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni DLX3 critici per la funzione di Dlx-3
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di DLX3 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Dlx-3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Dlx-3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus DLX3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Dlx-3 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Dlx-3 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia DLX3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio DLX3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.