DHRS2 Plasmide Double Nickase (h): sc-404988-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- DHRS2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il DHRS2 Double Nickase Plasmid (h) e il DHRS2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira DHRS2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: DHRS2 Antibody (1F10): sc-517054
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
DHRS2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404988-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DHRS2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404988-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **DHRS2** (deidrogenasi/riduttasi 2) codifica un’ossidoreduttasi NADPH-dipendente appartenente alla superfamiglia delle deidrogenasi/riduttasi a catena corta, che contribuisce all’omeostasi redox cellulare e al metabolismo. DHRS2 è stato collegato alla regolazione delle risposte allo stress e al controllo del ciclo cellulare, incluse interazioni riportate con la segnalazione associata a p53 e con vie che influenzano proliferazione e senescenza. Modulando l’equilibrio redox intracellulare, DHRS2 può incidere sulla gestione dello stress ossidativo e su programmi trascrizionali a valle rilevanti per la stabilità del genoma. Alterazioni dell’espressione di DHRS2 sono state osservate in molteplici contesti patologici, rendendolo un bersaglio utile per studi meccanicistici sulla riprogrammazione metabolica e sulla segnalazione adattativa allo stress nelle cellule umane.
DHRS2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus DHRS2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di DHRS2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di DHRS2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con DHRS2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.