CYP2C9 Plasmide Double Nickase (h): sc-403593-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CYP2C9 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CYP2C9 Double Nickase Plasmid (h) e il CYP2C9 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CYP2C9. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CYP2C9 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403593-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CYP2C9 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403593-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYP2C9 codifica una monoossigenasi del citocromo P450 eme-tiolato che catalizza la biotrasformazione ossidativa di diversi xenobiotici e substrati endogeni nel reticolo endoplasmatico. Nell’ambito del metabolismo di fase I, CYP2C9 contribuisce al trasferimento di elettroni dipendente dal bilancio redox tramite la NADPH–citocromo P450 reduttasi, modulando l’esposizione cellulare a intermedi reattivi e le successive vie di coniugazione. I polimorfismi genetici e le alterazioni dell’espressione epatica di CYP2C9 sono associati alla variabilità interindividuale nella clearance dei farmaci e alla suscettibilità alle reazioni avverse, rendendolo un locus chiave della farmacogenomica. Un’attività di CYP2C9 deregolata è inoltre studiata nel contesto dei meccanismi di danno epatico e del rimodellamento, a livello di vie biologiche, delle reti di detossificazione.
CYP2C9 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CYP2C9 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CYP2C9. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CYP2C9. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CYP2C9 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.