CYP1B1 Plasmide Double Nickase (m): sc-419899-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CYP1B1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CYP1B1 Double Nickase Plasmid (m) e il CYP1B1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Cyp1b1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CYP1B1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-419899-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CYP1B1 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-419899-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Cyp1b1** codifica l’enzima del citocromo P450 **CYP1B1**, una monoossigenasi eme-tiolata che catalizza il metabolismo ossidativo di substrati endogeni e xenobiotici, incluse reazioni di idrossilazione rilevanti per l’omeostasi di steroidi e retinoidi. L’attività di CYP1B1 è collegata a programmi trascrizionali guidati da **AHR** e a vie metaboliche di fase I che modulano le risposte cellulari ai ligandi ambientali e allo stress ossidativo. Attraverso il suo impatto sull’equilibrio redox e sulla produzione di metaboliti bioattivi, **Cyp1b1** è stato studiato nel contesto della biologia vascolare, dello sviluppo oculare e della suscettibilità tessuto-specifica al danno indotto da sostanze tossiche. Nei modelli murini, alterazioni della funzione di **Cyp1b1** possono influenzare reti di segnalazione a valle di intermedi metabolici, supportando ricerche meccanicistiche su metabolismo–infiammazione e fenotipi associati allo sviluppo.
CYP1B1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Cyp1b1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Cyp1b1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Cyp1b1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Cyp1b1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.