CRY2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403171-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CRY2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CRY2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CRY2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CRY2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CRY2 Anticorpo (3H4): sc-293263
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CRY2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403171-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CRY2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403171-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CRY2 codifica a criptocromo 2, uma flavoproteína componente do relógio circadiano central que atua principalmente como repressora transcricional dentro do circuito de retroalimentação CLOCK–BMAL1. Ao formar complexo com proteínas PER e modular a transcrição dirigida por E-box, a CRY2 ajuda a coordenar oscilações diárias na expressão gênica que afetam o controle do ciclo celular, as respostas a danos no DNA, o metabolismo e a sinalização endócrina. A atividade de CRY2 está ligada à degradação proteica dependente de ubiquitina e a vias de fosforilação que ajustam o período e a amplitude circadianos. A desregulação de programas circadianos associados à CRY2 tem sido implicada em fenótipos de sono e cronobiologia e é frequentemente estudada no contexto de distúrbios metabólicos e proliferativos, nos quais a perturbação do relógio altera a homeostase celular.
CRY2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CRY2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CRY2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CRY2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CRY2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.