Plasmide Double Nickase (h) CHCHD10: sc-407891-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CHCHD10 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CHCHD10 Double Nickase (h) et le plasmide CHCHD10 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CHCHD10. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CHCHD10 | sc-407891-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CHCHD10 | sc-407891-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHCHD10 code une protéine contenant un domaine hélice-enroulée–hélice–hélice-enroulée–hélice, localisée aux mitochondries, qui contribue au maintien de l’intégrité des crêtes mitochondriales et au bon fonctionnement de la chaîne respiratoire. Elle participe à des voies impliquées dans la phosphorylation oxydative, la dynamique mitochondriale et les réponses au stress cellulaire, influençant l’homéostasie bioénergétique et la susceptibilité à l’apoptose. La dérégulation ou les mutations de CHCHD10 ont été associées à des phénotypes neurodégénératifs, notamment des atteintes du spectre des maladies du motoneurone et des troubles fronto-temporaux, ce qui concorde avec son rôle dans le maintien de la protéostasie mitochondriale. Par conséquent, CHCHD10 est largement étudié dans des modèles de dysfonction mitochondriale, de stress protéotoxique et de métabolisme énergétique pertinent pour les neurones.
CHCHD10 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CHCHD10 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CHCHD10. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CHCHD10. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CHCHD10.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.