Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CEP55 Plasmide Double Nickase (h): sc-417522-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CEP55 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CEP55 Double Nickase Plasmid (h) e il CEP55 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CEP55. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CEP55 Antibody (B-8): sc-374051
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CEP55 Plasmide Double Nickase (h) | sc-417522-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CEP55 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-417522-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CEP55 (proteina centrosomiale 55) codifica un regolatore della mitosi che si localizza al centrosoma e al midbody, dove contribuisce a coordinare l’abscissione nelle fasi terminali della citochinesi. La proteina interagisce con il macchinario ESCRT e con i componenti associati del midbody per garantire la corretta risoluzione del solco di clivaggio e il completamento della divisione cellulare. L’alterazione di CEP55 perturba la dinamica del centrosoma, l’organizzazione del fuso mitotico e la stabilità cromosomica, collegando la sua disregolazione a fenotipi proliferativi e all’instabilità genomica osservati in diversi contesti tumorali. Di conseguenza, CEP55 viene spesso utilizzato per studiare il controllo del ciclo cellulare, l’uscita dalla mitosi e i meccanismi dell’aneuploidia in modelli cellulari umani.
CEP55 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CEP55 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CEP55. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CEP55. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CEP55 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.