CD79B Plasmide Double Nickase (h): sc-401760-NIC

CD79B codifica la subunità di segnalazione Ig-β (CD79B) del complesso del recettore per l’antigene dei linfociti B (BCR), formando un eterodimero con CD79A per collegare il riconoscimento dell’antigene alla segnalazione intracellulare. I motivi ITAM citoplasmatici vengono fosforilati in seguito all’attivazione del BCR, reclutando SYK e propagando il segnale attraverso le vie BTK, PI3K–AKT e NF-κB, che regolano l’attivazione, la sopravvivenza e la differenziazione delle cellule B. La funzione di CD79B influenza il traffico del recettore e l’ampiezza del segnale, integrandosi con processi quali la selezione dipendente dall’antigene e la tolleranza immunitaria. Le alterazioni dei componenti della via del BCR, incluso CD79B, sono ampiamente studiate nel contesto della disregolazione delle cellule B e della biologia delle neoplasie linfoidi, a conferma della sua rilevanza come nodo meccanicistico nell’immunologia e nella ricerca sulle malattie ematologiche.

CD79B Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CD79B nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CD79B. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CD79B. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CD79B interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.