CD7 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-407287

Panoramica

CD7 codifica un recettore transmembrana della superfamiglia delle immunoglobuline, espresso prevalentemente sui timociti e sui linfociti T maturi, dove partecipa all’attivazione dei linfociti T, all’adesione e all’organizzazione della sinapsi immunologica attraverso interazioni che modulano le soglie di segnalazione. La segnalazione associata a CD7 si integra con vie legate alle chinasi della famiglia SRC e con i pathway connessi a MAPK, che influenzano la differenziazione dei linfociti T, le risposte citochiniche e la funzione effettrice citotossica. L’alterata espressione di CD7 è spesso utilizzata come caratteristica immunofenotipica nella biologia dei linfociti ed è studiata nel contesto di modelli di neoplasie delle cellule T e di disregolazione immunitaria. In quanto marcatore di superficie associato a ruoli funzionali di segnalazione, CD7 rappresenta un nodo maneggevole per analizzare le reti di segnalazione prossimali al recettore dei linfociti T e i programmi di linea cellulare.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CD7 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene CD7 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del CD7 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto CD7 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CD7.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di CD7 per lo studio della segnalazione di CD7, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni CD7 critici per la funzione di CD7
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di CD7 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal CD7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal CD7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus CD7. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal CD7 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR CD7 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia CD7 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio CD7 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.