CD67 Plasmide Double Nickase (h): sc-405743-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CD67 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CD67 Double Nickase Plasmid (h) e il CD67 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CEACAM8. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CD67 Antibody (GM2H6): sc-101383
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CD67 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405743-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD67 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405743-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CEACAM8 codifica CD67, un membro della famiglia delle molecole di adesione cellulare correlate all’antigene carcinoembrionario associato ai granulociti, particolarmente abbondante nei neutrofili umani e sovraregolato durante l’attivazione. CD67 partecipa alle interazioni cellula-cellula e contribuisce all’adesione dei neutrofili, alle risposte associate alla degranulazione e alla modulazione della segnalazione infiammatoria nel sistema immunitario innato. Grazie al suo ruolo nel traffico leucocitario e nella funzione effettrice, CEACAM8 è spesso studiato in vie associate all’immunità mucosale, alla difesa antimicrobica e all’infiammazione guidata dalle citochine. Pattern di espressione alterati nelle cellule mieloidi e nei tessuti infiammati hanno reso CEACAM8 un utile marcatore di ricerca negli studi sui disturbi infiammatori e sull’infiltrazione immunitaria associata ai tumori.
CD67 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CEACAM8 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CEACAM8. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CEACAM8. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CEACAM8 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.