CAMTA1 Plasmide Double Nickase (h): sc-405328-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CAMTA1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CAMTA1 Double Nickase Plasmid (h) e il CAMTA1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CAMTA1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CAMTA1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405328-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CAMTA1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405328-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CAMTA1 codifica per il calmodulin-binding transcription activator 1, un fattore di trascrizione nucleare che collega la segnalazione Ca2+/calmodulina ai programmi di espressione genica. Attraverso il suo dominio di legame al DNA CG-1 e le ripetizioni regolatorie ad anchirina, CAMTA1 integra segnali calcio-dipendenti con la cromatina e il controllo trascrizionale, influenzando la differenziazione neuronale, la trascrizione associata all’attività sinaptica e, più in generale, vie di risposta allo stress. Un’alterata regolazione di CAMTA1 è stata associata a fenotipi di tipo neuroevolutivo e neurodegenerativo, e la sua alterazione genomica è osservata ricorrentemente in diversi tumori, a supporto della sua rilevanza negli studi sulla disregolazione della trascrizione. Queste caratteristiche rendono CAMTA1 un bersaglio utile per analizzare le reti trascrizionali guidate dal calcio e le transizioni di stato cellulare in sistemi modello umani.
CAMTA1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CAMTA1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CAMTA1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CAMTA1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CAMTA1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.