C7 Plasmide Double Nickase (h): sc-404773-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- C7 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il C7 Double Nickase Plasmid (h) e il C7 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira C7. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
C7 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404773-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
C7 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404773-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il componente del complemento C7 codifica una proteina della via terminale del sistema del complemento che partecipa all’assemblaggio del complesso di attacco alla membrana (MAC) legandosi al complesso C5b-6 e promuovendo l’inserimento di C8 e la polimerizzazione di C9 sulle membrane bersaglio. Questa attività sostiene la difesa immunitaria innata e i meccanismi di eliminazione infiammatoria attraverso le vie del complemento classica, lectinica e alternativa, che convergono nell’attivazione di C5. Un’attivazione del complemento disregolata e un’alterata formazione del MAC sono state implicate nel danno tissutale mediato dal sistema immunitario e nella suscettibilità a determinate infezioni, rendendo C7 un nodo utile per studiare la funzione effettrice del complemento. C7 fornisce inoltre un indicatore facilmente misurabile per indagare la segnalazione immunitaria extracellulare, le risposte opsono-fagocitarie e il crosstalk con l’infiammazione guidata dalle citochine.
C7 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus C7 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di C7. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di C7. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con C7 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.