C1QBP Plasmide Double Nickase (h): sc-400911-NIC

C1QBP (proteina legante il componente 1q del complemento; nota anche come p32/gC1qR) è una proteina umana multifunzionale che si localizza prevalentemente nei mitocondri e partecipa alla regolazione della fosforilazione ossidativa, della funzione del ribosoma mitocondriale e del metabolismo energetico cellulare. Interagisce inoltre con componenti del sistema del complemento e può influenzare, in modo dipendente dal contesto, la segnalazione infiammatoria e i processi dell’immunità innata. Attraverso i suoi ruoli nell’omeostasi mitocondriale e nella gestione di RNA/proteine, C1QBP contribuisce al controllo dell’apoptosi, delle risposte allo stress e dei programmi di proliferazione. Alterazioni nell’espressione o nella localizzazione di C1QBP sono state associate a un metabolismo disregolato e a fenotipi infiammatori descritti in molteplici contesti patologici, a supporto della sua utilità come bersaglio meccanicistico nella ricerca su immunometabolismo e biologia mitocondriale.

C1QBP Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus C1QBP nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di C1QBP. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di C1QBP. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con C1QBP interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.