BTBD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-431551

概要

Btbd2 は、BTB/POZ ドメインを含むタンパク質である BTBD2 をコードしており、ユビキチン依存的なプロテオスタシス（タンパク質恒常性）や細胞因子の制御された分解回転に影響するタンパク質間相互作用ネットワークにおいて、アダプターとして機能すると考えられている。BTBD2 に関連する過程は、タンパク質安定性の調節を介してシグナル伝達の強度やストレス応答経路の制御に関与し、その下流で細胞周期の進行や分化プログラムにも影響を及ぼすことが示唆されている。マウス系では、Btbd2 を撹乱することにより、BTB ドメインの足場タンパク質が組織恒常性や発生表現型にどのように寄与するかを検証できる。プロテオスタシスの破綻とシグナル制御の異常は、増殖異常や神経発達の脆弱性を含むさまざまな疾患生物学の文脈において広く関連している。

BTBD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるBtbd2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Btbd2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Btbd2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、BTBD2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、BTBD2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Btbd2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• BTBD2の機能に不可欠なBtbd2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Btbd2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• BTBD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびBTBD2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Btbd2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  BTBD2 HDRプラスミド（m）および BTBD2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはBtbd2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のBtbd2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。