Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
bradykinin B1 R Plasmide Double Nickase (h): sc-401169-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- bradykinin B1 R Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il bradykinin B1 R Double Nickase Plasmid (h) e il bradykinin B1 R Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira BDKRB1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: bradykinin B1 R Antibody (F-11): sc-518136
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
bradykinin B1 R Plasmide Double Nickase (h) | sc-401169-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
bradykinin B1 R Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401169-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BDKRB1 codifica il recettore inducibile della bradichinina B1, un recettore accoppiato a proteine G (GPCR) la cui espressione aumenta in risposta a segnali infiammatori e a danno tissutale. Una volta attivato dalle chinine des-Arg, il recettore B1 della bradichinina (bradykinin B1 R) promuove la segnalazione attraverso le vie Gαq/Gαi, che aumentano il calcio intracellulare e attivano i programmi MAPK e NF-κB, modulando la produzione di citochine, il reclutamento dei leucociti e le risposte vascolari. Questo recettore partecipa a reti di segnalazione infiammatorie e nocicettive ed è spesso studiato in contesti quali l’infiammazione cronica e i meccanismi legati al dolore, oltre che nella disfunzione vascolare e nello stress metabolico. Alterazioni dell’espressione e della segnalazione di BDKRB1 sono state associate a microambienti infiammatori rilevanti per la malattia, a supporto del suo utilizzo come nodo meccanicistico per la dissezione di vie di segnalazione in modelli cellulari umani.
bradykinin B1 R Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus BDKRB1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di BDKRB1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di BDKRB1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con BDKRB1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.