ATF3 Plasmide Double Nickase (h): sc-416577-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ATF3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ATF3 Double Nickase Plasmid (h) e il ATF3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ATF3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ATF3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-416577-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ATF3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-416577-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATF3 (fattore di trascrizione attivante 3) è un fattore di trascrizione bZIP a risposta immediata e inducibile dallo stress, che integra diversi segnali cellulari, inclusi i pathway MAPK/JNK, NF-κB e della risposta alle proteine mal ripiegate (unfolded protein response). Legandosi a elementi di tipo CRE/ATF e formando omo- o eterodimeri con membri della famiglia AP-1, ATF3 modula programmi trascrizionali che controllano infiammazione, apoptosi, adattamento del ciclo cellulare e rimodellamento metabolico. La sua espressione viene rapidamente indotta da danno al DNA, stress ossidativo, citochine e stress del reticolo endoplasmatico (ER), collocando ATF3 come regolatore chiave delle risposte trascrizionali adattative. Un’attività di ATF3 deregolata è stata associata alla biologia tumorale, alla segnalazione immunitaria e a modelli di danno tissutale, rendendolo utile per analizzare reti di stress e infiammazione dipendenti dal contesto nelle cellule umane.
ATF3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ATF3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ATF3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ATF3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ATF3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.