ATAD2 Plasmide Double Nickase (h): sc-412018-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ATAD2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ATAD2 Double Nickase Plasmid (h) e il ATAD2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ATAD2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ATAD2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-412018-NIC | 20 µg | $410.00 |
ATAD2 (proteina 2 contenente il dominio AAA della famiglia delle ATPasi) è un’ATPasi AAA+ associata alla cromatina che funge da co-regolatore trascrizionale, accoppiando attività di rimodellamento dipendenti dall’ATP al riconoscimento degli istoni acetilati tramite il proprio bromodominio. Partecipa all’organizzazione della cromatina, a processi legati alla replicazione e alla progressione del ciclo cellulare, sostenendo programmi guidati da fattori come MYC ed E2F in stati proliferativi. Un’espressione deregolata di ATAD2 è stata associata a reti trascrizionali oncogeniche e a fenotipi di instabilità genomica in molteplici contesti tumorali. Queste caratteristiche rendono ATAD2 un nodo utile per studiare il controllo epigenetico dell’espressione genica, l’accessibilità della cromatina e le risposte allo stress replicativo nelle cellule umane.
ATAD2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ATAD2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ATAD2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ATAD2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ATAD2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.