Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
ARL4D Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406905
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ARL4D Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico ARL4D, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ARL4D Antibody (F-2): sc-271273
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ARL4D Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-406905 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
ARL4D (ADP ribosylation factor-like GTPase 4D) è una piccola proteina legante il GTP simile alle ARF che cicla tra gli stati legati a GDP e a GTP per coordinare il traffico di membrana e il rimodellamento del citoscheletro. È stata implicata nella regolazione della dinamica dell’actina, del trasporto vescicolare e della segnalazione compartimentalizzata a livello delle membrane cellulari, processi che influenzano forma, polarità e motilità cellulare. L’attività di ARL4D si interseca con vie controllate da piccole GTPasi che governano il reclutamento di effettori alle membrane e l’organizzazione delle rotte di traffico. Alterazioni dell’espressione o della segnalazione di ARL4D sono state esplorate nel contesto di fenotipi di proliferazione e migrazione disregolate, rilevanti in oncologia e in altri disturbi che coinvolgono la dinamica di membrana.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ARL4D (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ARL4D in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ARL4D insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ARL4D a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ARL4D.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ARL4D per lo studio della segnalazione di ARL4D, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni ARL4D critici per la funzione di ARL4D
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ARL4D per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal ARL4D CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal ARL4D CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ARL4D. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal ARL4D Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR ARL4D (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ARL4D per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ARL4D definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.