ARID2 Plasmide Double Nickase (h): sc-401863-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ARID2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ARID2 Double Nickase Plasmid (h) e il ARID2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ARID2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ARID2 Antibody (E-3): sc-166117
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ARID2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401863-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ARID2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401863-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARID2 (AT-rich interaction domain 2) codifica una subunità legante il DNA del complesso PBAF (SWI/SNF) di rimodellamento della cromatina ATP-dipendente, che contribuisce al posizionamento dei nucleosomi per regolare la trascrizione, l’attività degli enhancer e l’accessibilità della cromatina. Attraverso queste funzioni, ARID2 contribuisce al controllo dei programmi del ciclo cellulare, della specificazione di linea e delle risposte al danno del DNA, plasmando le reti di espressione genica a livello dell’intero genoma. La perdita o l’alterazione di ARID2 compromette la regolazione epigenetica ed è stata associata a stati trascrizionali aberranti osservati in molteplici tipi di tumore, rendendolo un bersaglio utile per studiare le dipendenze dal rimodellamento della cromatina. ARID2 è inoltre utilizzato come fattore modello per scomporre i meccanismi specifici di PBAF, distinti dai complessi BAF canonici, nell’organizzazione del genoma e nel controllo trascrizionale.
ARID2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ARID2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ARID2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ARID2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ARID2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.