ARH1 Plasmide Double Nickase (m): sc-419017-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ARH1 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ARH1 Double Nickase Plasmid (m) e il ARH1 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Adprh. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ARH1 Plasmide Double Nickase (m) | sc-419017-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Adprh** codifica **ARH1**, un’idrolasi degli accettori di ADP-ribosio che annulla la **mono-ADP-ribosilazione** su residui di **arginina**, regolando così il ricambio dei marcatori di ADP-ribosio sulle proteine. Controllando questa modificazione post-traduzionale, ARH1 contribuisce alla segnalazione dipendente da **NAD⁺** e a dinamiche più ampie di ADP-ribosilazione che si intrecciano con le risposte cellulari allo stress, il metabolismo e la funzione proteica. Alterazioni dell’ADP-ribosilazione legata all’arginina sono state associate a reti di segnalazione deregolate e a un’omeostasi cellulare modificata, rendendo **Adprh** un locus utile per studi meccanicistici della biologia dell’ADP-ribosio. Nei modelli murini, la manipolazione dell’attività di ARH1 aiuta a indagare come l’ADP-ribosilazione reversibile plasmi la fisiologia dei tessuti e fenotipi rilevanti per la malattia, senza implicare esiti terapeutici.
ARH1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Adprh nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Adprh. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Adprh. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Adprh interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.