apoA-II Plasmide Double Nickase (h): sc-404987-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- apoA-II Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il apoA-II Double Nickase Plasmid (h) e il apoA-II Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira APOA2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: apoA-II Antibody (ZZ6): sc-101261
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
apoA-II Plasmide Double Nickase (h) | sc-404987-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
apoA-II Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404987-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
APOA2 codifica l’apolipoproteina A-II (apoA-II), un importante componente strutturale delle lipoproteine ad alta densità (HDL) che modula la stabilità delle particelle lipoproteiche, il legame ai lipidi e il rimodellamento in circolo. apoA-II influenza passaggi chiave nella gestione di colesterolo e trigliceridi intervenendo sulle interazioni con fattori di trasferimento lipidico e fattori lipolitici, contribuendo così a determinare il trasporto inverso del colesterolo e, più in generale, le vie del metabolismo lipidico. Variazioni nell’espressione o nella sequenza di APOA2 sono state associate ad alterazioni dei profili lipidici plasmatici e del rischio di tratti cardiometabolici, a supporto del suo impiego come nodo meccanicistico negli studi su dislipidemia e omeostasi metabolica. Modelli in vitro e in vivo che bersagliano apoA-II consentono di analizzare la composizione delle HDL, il flusso lipidico e i processi infiammatori o ossidativi a valle collegati alla biologia dell’aterosclerosi.
apoA-II Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus APOA2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di APOA2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di APOA2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con APOA2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.