APLP1 Plasmide Double Nickase (h): sc-403937-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- APLP1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il APLP1 Double Nickase Plasmid (h) e il APLP1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira APLP1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
APLP1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403937-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
APLP1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403937-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
APLP1 (proteina 1 simile al precursore della beta-amiloide, amyloid beta precursor-like protein 1) è una glicoproteina neuronale transmembrana di tipo I della famiglia APP che partecipa all’organizzazione delle sinapsi, alla crescita dei neuriti e alla segnalazione dipendente dall’attività. Va incontro a un processamento proteolitico regolato e contribuisce all’adesione cellula-cellula e ai processi di traffico vescicolare che modellano la connettività neuronale. La funzione di APLP1 si interseca con vie che regolano la maturazione sinaptica, lo smistamento endocitico e il turnover delle proteine di membrana, collegandola a meccanismi che influenzano le reti di processamento amiloidogenico nel sistema nervoso. Alterazioni della biologia della famiglia APP e della proteostasi sono state associate a fenotipi rilevanti per le malattie neurodegenerative, rendendo APLP1 un bersaglio utile per studiare l’omeostasi neuronale e la disfunzione sinaptica.
APLP1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus APLP1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di APLP1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di APLP1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con APLP1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.