Adipsin Plasmide Double Nickase (h): sc-401782-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Adipsin Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Adipsin Double Nickase Plasmid (h) e il Adipsin Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CFD. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Adipsin Antibody (D10/4): sc-47683
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Adipsin Plasmide Double Nickase (h) | sc-401782-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Adipsin Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401782-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il fattore D del complemento (CFD), noto anche come adipsina, è una proteasi a serina che funge da enzima limitante la velocità della via alternativa del complemento, scindendo il fattore B in presenza di C3b per generare la C3 convertasi. Attraverso questo ruolo, modula l’amplificazione del complemento, l’opsonizzazione e la segnalazione infiammatoria, collegando l’immunità innata all’omeostasi tissutale. Il CFD è altamente espresso nel tessuto adiposo ed è stato implicato nel crosstalk tra regolazione metabolica e attivazione immunitaria. Un’attività del complemento disregolata che coinvolge il CFD è associata a fenotipi infiammatori e metabolici ed è spesso studiata nel contesto della biologia del tessuto adiposo, del danno tissutale guidato dal complemento e dei meccanismi di malattia immuno-mediati.
Adipsin Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CFD nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CFD. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CFD. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CFD interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.