ADCK5 Plasmide Double Nickase (m): sc-435282-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ADCK5 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ADCK5 Double Nickase Plasmid (m) e il ADCK5 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Adck5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ADCK5 Plasmide Double Nickase (m) | sc-435282-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ADCK5 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-435282-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Adck5 codifica la chinasi proteica atipica ADCK5, un membro della famiglia delle chinasi contenenti il dominio aarF, implicata nella regolazione mitocondriale e nell’omeostasi energetica cellulare. Le proteine ADCK sono associate alla biologia del coenzima Q e alla fosforilazione ossidativa, collocando ADCK5 in vie che influenzano l’equilibrio redox, la produzione di ATP e il controllo di qualità dei mitocondri. L’alterazione di questi processi può modificare la segnalazione mediata dalle specie reattive dell’ossigeno e l’adattamento metabolico, rendendo Adck5 un bersaglio rilevante per studi meccanicistici della disfunzione mitocondriale e dei fenotipi di risposta allo stress correlati in modelli cellulari e tissutali di topo.
ADCK5 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Adck5 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Adck5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Adck5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Adck5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.