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ADAR1双切口酶质粒(m) | sc-425147-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ADAR1双切口酶质粒(m2) | sc-425147-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Adar 编码 ADAR1,这是一种作用于 RNA 的腺苷脱氨酶,可在双链 RNA 结构内催化 A-to-I(腺苷到次黄嘌呤)编辑,从而重塑转录本序列、剪接模式以及 RNA 稳定性。ADAR1 通过限制对内源性双链 RNA(dsRNA)的异常识别,并影响干扰素刺激基因程序及 MDA5/MAVS 等 RNA 感知通路,是维持先天免疫稳态的关键调节因子。凭借这些功能,它参与转录后调控、应激反应以及免疫原性核酸的控制,因此与神经发育、炎症相关表型和肿瘤免疫信号等研究密切相关。在实验模型中,ADAR1 活性及 RNA 编辑图谱的改变常被用作 RNA 代谢失衡和免疫激活的分子读出指标。
ADAR1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Adar 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Adar内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Adar的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Adar基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。