ABR Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-407250

Panoramica

ABR (active BCR-related) codifica una proteina multidominio con attività di Rho GTPasi-activating protein (GAP) che modula piccole GTPasi come RAC1 e CDC42, influenzando così la dinamica del citoscheletro di actina, l’adesione cellulare, la formazione di ruffle di membrana e il traffico vescicolare. Attraverso la sua attività GAP e le funzioni di scaffold di segnalazione, ABR partecipa a vie che collegano segnali indotti dai recettori al rimodellamento del citoscheletro e alla motilità cellulare. Alterazioni della segnalazione delle Rho GTPasi regolata da ABR sono state associate a fenotipi di proliferazione e migrazione deregolati, rilevanti per la trasformazione oncogena e il comportamento invasivo. ABR è inoltre studiato nel contesto della segnalazione delle cellule immunitarie e dei processi neuro-sviluppativi, dove è necessario un controllo preciso delle GTPasi della famiglia Rho.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ABR (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ABR in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ABR insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ABR a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ABR.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ABR per lo studio della segnalazione di ABR, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni ABR critici per la funzione di ABR
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ABR per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal ABR CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal ABR CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ABR. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal ABR Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR ABR (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ABR per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ABR definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.