Abin-1 Plasmide Double Nickase (h): sc-418363-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Abin-1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Abin-1 Double Nickase Plasmid (h) e il Abin-1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TNIP1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Abin-1 Antibody (G-12): sc-376999
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Abin-1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-418363-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Abin-1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-418363-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TNIP1 codifica Abin-1 (A20-binding inhibitor of NF-κB activation), un adattatore legante l’ubiquitina che modula la segnalazione infiammatoria coordinando complessi ubiquitina-dipendenti a valle di recettori quali TNFR, TLR e IL-1R. Abin-1 interagisce con l’asse regolatorio A20/TNFAIP3 per limitare l’output delle vie NF-κB e MAPK, modellando la produzione di citochine, la sopravvivenza cellulare e le risposte allo stress. Attraverso i suoi ruoli nell’editing dell’ubiquitina e nella terminazione del segnale, TNIP1 contribuisce all’omeostasi dell’immunità innata e adattativa. Alterazioni genetiche e di espressione di TNIP1 sono state associate a disregolazione immunitaria e fenotipi infiammatori, a supporto della sua rilevanza negli studi su autoimmunità, infiammazione delle barriere e biologia tumorale dipendente dal contesto.
Abin-1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TNIP1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TNIP1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TNIP1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TNIP1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.